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多重荧光免疫组化检测

更新时间:2021-12-21

简要描述:

多重荧光免疫组化检测与显色法多重免疫组化不同,多重荧光免疫组化(mIHC)是基于酪胺信号放大( Tyramide Signal Amplification,TSA)技术,可实现在同一组织切片样本上对多个靶标进行区别标记,进而分析组织微环境中蕴含的复杂信息。

多重荧光免疫组化检测(mIHC):

主要的技术原理来自TSA技术,TSA即酪酰胺信号放大(Tyramide signal amplification)是一类利用辣根过氧化酶(HRP)对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。

        

多重荧光免疫组化检测技术可与高性能染料Alexa Fluor®、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。 TSA主要原理是利用酪胺Tyramide的过氧化物酶反应(酪胺盐在HRP催化H202下形成共价键结合位点),产生大量的酶促产物,该产物能与周围的蛋白残基(包括色氨酸、组氨酸和酪氨酸残基)结合,这样在抗原-抗体结合部位就有大量的生物素沉积,与随后加入的Streptavidin—HRP/荧光基团结合,经几次这样的循环放大,可以结合大量的酶分子or荧光基团,结果使其检测信号得到几何级放大。


多重荧光免疫组化检测优势:
1.高科研价值:分人、鼠两个系列,方便在小鼠肿瘤模型和人样品上进行平行实验,进行转化医学研究;

2.高兼容性:选用荧光染料标记适用于所有配备了紫外、FITC、CY3、CY5 等波段带荧光的显微镜、共聚焦显微镜和荧光切片扫描设备;

3.稳定性:加样过程无需避光操作,样品染色完4度保存半年,-20℃保存一年,荧光依然满足拍照需求;

4.方便性:所有抗体都经过筛选,特异性好,染色浓度均经过优化,减少研究者自己摸条件的过程。

 



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