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伊文思蓝染色液

更新时间:2022-06-16

简要描述:

伊文思蓝染色液( Evans blue汉称偶氮蓝,分子式C34H24NNa4O14S4,分子量为96080
CAS号为314-13-6伊文思蓝与台盼蓝都是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性和细胞是否存活。

tunel细胞凋亡检测服务会用到伊文思蓝染色液( Evans blue汉称偶氮蓝,分子式C34H24NNa4O14S4,分子量为96080

CAS号为314-13-6伊文思蓝与台盼蓝都是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性和细胞是否存活。

操作步骤:
(一)血脑屏障通透性

1、取处理后的实验动物(以小鼠为例,静脉注射 Evans blue stain(0.5%小鼠眼睛、皮肤出现蓝色。0.5~1h后处死小鼠

2、脑组织脑组织置于15m离心管中,加入1 m pbs,迅速用组织匀浆器将脑组织制成匀浆

3、取上清,加入等量三lu乙酸,4℃孵育。3、取上清,按上清:丙酮=3:7比例加入丙酮,室温孵育24h 4、离心15min5、取上述溶液,用分光光度计测620nm处吸光值OD值)。同时测定已知不同梯度的标准依文思蓝的○D值,绘制标准曲线。根据标准曲线计算出待测待测样品的依文思蓝含

(二)活细胞染色

1、取100μ重悬细胞到常规离心管内,入10oμ Evans blue stair轻轻混匀染色染色时间可适当延长,但不宜超过10min)
2、吸取少量经过染色后的细胞。通常如果要比较精确地进行定量,每个细胞样品至少数500个细胞,数出蓝色细胞和细胞总数。

细胞存活率计算公式如下细胞存活率=(细胞总数-蓝色细胞数)/细胞总数x100%

 
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