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革兰氏染色液

更新时间:2021-12-15

简要描述:

革兰氏染色液
革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师Gram创立。未经染色之细菌,由于其与周围环境折光率差别甚小,故在显微镜下极难观察。染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,而用以分类鉴定。革兰氏染色属复染法

革兰氏染色液

革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师Gram创立。未经染色之细菌,由于其与周围环境折光率差别甚小,故在显微镜下极难观察。染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,而用以分类鉴定。革兰氏染色属复染法

革兰氏染色液原理

通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密,故遇乙醇或丙酮脱色处理时,因失水反而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇处理不会出现缝隙,因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内,使其仍呈紫色;而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差,在遇脱色剂后,以类脂为主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出,因此通过乙醇脱色后仍呈无色,再经沙黄等红色染料复染,就使革兰氏阴性菌呈红色。染色的差异主要是由于阴性与阳性细菌细胞壁的差异所引起的。

材料

1.葡萄球菌和大肠杆菌混合菌液。

2.结晶紫染色液

3.革兰氏碘液

4.95%酒精。

5.番红染液

6.载玻片方法、涂片标本的制备(见实验一)

革兰氏染色法1.初染:在上述已固定的涂片上,滴加结晶紫染液,染色1分钟,水洗。

2.媒染:滴加革兰氏碘液,作用1-3分钟,水洗3.脱色:滴加95%酒精,并频频摇动玻片,至无紫色脱出为止(约20秒),水洗复染:加番红染液,复染半分钟,水洗,用吸水纸印干后,油镜检查结果:视野中可以察见两种细菌葡萄球菌:紫色、球形、葡萄状排列。

大肠杆菌:红色、杆状、散在排列。


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