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β-gal染色

更新时间:2022-10-13

简要描述:

β-gal染色是用来对骨组织染色的一种染色方法,它一种是细胞溶酶体中的水解酶,能把乳糖水解成葡萄糖和半乳糖的酶。

β-gal染色是用来对骨组织染色的一种染色方法,它一种是细胞溶酶体中的水解酶,能把乳糖水解成葡萄糖和半乳糖的酶。

绝大多数正常细胞被认为仅有有限的分裂能力,在不能分裂后就进入衰老(senescence)状态。此时细胞仍然是存活的,但细胞的基因和蛋白的表达谱发生了很大改变。衰老(senescence)的细胞不能在一些常规的刺激下再诱导细胞分裂,并且衰老细胞的细胞周期分布也比较特殊,不同于一些损伤诱导的细胞休眠,也不同于细胞生长接触抑制的情况。衰老细胞细胞通常体积变大,表达pH 6.0时有高酶活性的β-半乳糖苷酶

β-gal染色试剂盒(β- Galactosidase Staining Kit是一种基于衰老时SA-阝Gal( senescence- associatedβ- galactosidase)活性水平上调而对衰老细胞或组织进行染色检测的试剂盒。β-半乳糖苷酶染色试剂盒以Ⅹ-Ga为底物,在衰老特异性的β-半乳糖苷酶催化下会生成深蓝色产物,光学显微镜下很容易观察到变成蓝色的表达β-半乳糖苷酶的细胞或组织。对于组织切片或组织块,可以检测的样品数量视样品的大小而定,对于普通的切片也至少足够检测100个样品,使用6孔板测定,足够测定100个样品。

注意事项

1、β-半乳糖苷酧染色固定液有_定的腐蚀性和毒性,操作时请注意防护

2、β-半乳糖苷酶染色反应依赖于特定的pH条件,不能在二氧化碳培养箱中进行染色反应。用于细胞培养的二氧化碳培养箱中较高浓度的二氧化碳会影响染色工作液的pH值,而导致染色失败。

3、β-半乳糖苷酶染色液B在刚刚溶解后会观察到有沉淀,属正常现象,充分混匀或Ⅴ ortex后,沉淀会全部溶解。作为常规,试剂使用前必须确保沉淀全部溶解,并且混匀。

4、配制染色工作液时需使用聚丙烯(φ polypropylene)容器或玻璃容器,不宜使用聚苯乙烯( polystyrene)容器。但染色时可以在聚苯乙烯( polystyrene)容器中进行,例如普通的6孔板就可以用作染色的容器需自备PBS或HBSS( Hanks balanced salt solution

注:为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


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