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细胞迁移和侵袭实验

更新时间:2022-06-16

简要描述:

细胞迁移和侵袭实验
活体细胞通常都具有一定的迁移能力,不同细胞的迁移能力不同。与迁移相类似的能力是侵袭,具有裂解细胞基质的能力的细胞通常具有较强的侵袭能力。

细胞迁移和侵袭实验

活体细胞通常都具有一定的迁移能力,不同细胞的迁移能力不同。与迁移相类似的能力是侵袭,具有裂解细胞基质的能力的细胞通常具有较强的侵袭能力。大部分肿瘤细胞的迁移能力较强,这也是反应肿瘤细胞体内发生转移的一个重要指标。通常会先对细胞的迁移能力进行检测,进一步再观察该细胞是否具有侵袭能力。在进行迁移和侵袭实验过程中,我们会选择多种方法在不同的时间点进行检测。综合判断某种细胞的迁移和侵袭能力。

细胞迁移和侵袭实验步骤
  一、将小室放入培养板中,在上室加入300 ?l预温的无血清培养基,室温下静置15-30 min,使基质胶再水化。再吸去剩余培养液。
  二、制备细胞悬液
  三、接种细胞
  测量外泌体的粒径分布一直以来都是外泌体表征的重要组成部分。但是由于外泌体的尺寸仅为30~200 nm,所以必须借助一些特殊的检测手段才能够对这种在光学显微镜下不可视的颗粒进行观测。本篇就外泌体粒径测量技术的发展进行简述,并对不同技术的差异进行比较。
  在外泌体发现的早期,由于还没有专门针对这类尺寸颗粒的分析方法,因此直接在电镜下面观察粒径并统计成为了最早的外泌体粒径统计方法。
  由于外泌体与材料学所合成的脂质体在形态上十分相似,因此用于脂质体表征的动态光散射技术(DLS)便被应用于外泌体的尺寸测量上。DLS利用光射到远小于其波长的小颗粒上时会产生瑞利散射现象,通过观察散射光的强度随时间的变化推算出溶液中颗粒的大小。但是这种技术会受到测量物质的颜色、电性、磁性等理化特性的影响,并且对于灰尘和杂质十分敏感。因此使得DLS在测量尺寸较小的粒子时,测量出的粒径与实际的分布具有较大的偏差。
  为了弥补DLS的短板,纳米粒子跟踪分析(NTA)技术孕育而生。这种技术采用激光散射显微成像技术,用于记录纳米粒子在溶液中的布朗运动轨迹,并通过Stokes-Einstein方程推算粒子大小。这种技术能够对30~1000 nm的粒径进行测量,因此能够提供更为精确的粒径数据。在诸多文献的测试中均取得了较DLS更好的精度,因此成为目前最为主流的外泌体尺寸测量手段。

 

 
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