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质谱流式细胞技术服务

更新时间:2022-10-13

简要描述:

细胞增殖是指细胞在周期调控因子的作用下,通过DNA复制、RNA转录和蛋白质合成等复杂反应而进行的分裂系列过程。其中核DNA的复制倍增是整个过程的重要特征。细胞增殖检测技术广泛应用于分子生物学遗传学肿瘤生物学免疫学药理和药代动力学等研究领域。

  质谱流式细胞技术服务的质谱流式细胞技术(mass cytometry,MC)就是将ICP-MS应用到单个细胞的分析,原理是用纯化的单元素同位素标记抗体,然后使用ICP-MS检测该元素离子峰。操作流程简单,如图1所示,首先细胞用带有金属元素(一般是镧系金属)的特异性抗体标记3-4,然后被送入质谱流式细胞仪,细胞以单个细胞液滴状态被雾化后进入高温等离子体,产生自由原子,四级杆选择只通过镧系金属质量范围内的离子,去除其余离子,利用飞行时间质谱(TOF mass spectrometry)检测镧系金属离子的相对信号强度。
  传统流式细胞术用荧光基团作为报告分子,通过对发射光强度定量以确定目标分子的表达量,但荧光基团发射谱常有重合,尤其是在同一个实验中进行多参数测量的情况下,难以区分多个荧光基团。质谱流式细胞技术使用单一分子量的稳定镧系金属代替荧光基团作为报告分子,元素质谱分析仪能够通过分子量准确区分不同原子质量,并且不同镧系金属质量没有信号重叠,增加了定量的准确性。
  目前,质谱流式细胞技术可以同时对51个靶蛋白进行检测,每秒检测1000个细胞,平均每天可检测100个样品,检测限为100个拷贝分子,已经过验证的镧系金属标记抗体种类超过400种;除常规蛋白外,质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰1,蛋白降解产物5,检测细胞存活率,细胞大小,mRNA转录子表达量6,DNA合成速率7以及蛋白酶活性8等的测定。
  多路质谱流式细胞技术
  正如蛋白质组学中的非标记定量,质谱流式细胞技术对靶点的定量准确性也受到不同仪器离子化效率的差异、仪器状态等的影响;同时,传统的质谱流式细胞技术每次只能检测一个样品,通量较低。因此,质量标签细胞条码技术(mass-tag cellular barcoding,MCB)应运而生。
  细胞经过药物等处理后,用多聚甲醛固定后,使用MCB试剂对不同样本的细胞进行条形码标记,然后将不同样本混合后进行常规质谱流式细胞分析前处理和检测。最终通过检测条形码对应的元素离子,对细胞进行样品归类。
 
  质谱流式细胞技术服务应用领域
  在医学科研领域的应用
  寻找与疾病发生、发展、复发相关的生物标志物(早期诊断、伴随诊断、复发预测)
  免疫系统动态监测,寻找与临床结果相关的生物标志物(治疗有效人群筛选、药效分析、预后评估)
  辅助进行疾病分型、分级
  特定人群、部位的免疫特征分析(如孕妇、胎儿、肠道等)
  在药物研发领域的应用
  临床前研究:
  药理学阐述(先导化合物、激酶抑制剂、抑制剂等)
  药物对免疫系统的影响分析
  临床研究:
  临床试验患者入组优化
  联合用药疗效分析
  治疗后免疫动态监测,寻找与临床结果相关的生物标志物
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