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PAS糖原染色

更新时间:2021-12-21

简要描述:

PAS糖原染色(Periodic Acid-Schiff stain)在组织学上,主要用来检测组织中的糖类。过碘酸把糖类相邻两个碳上的羟基氧化成醛基,再用Schiff试剂和醛基反应使呈现紫红色。

PAS糖原染色又称过碘酸雪夫染色,糖原染色。一般用来显示糖元和其它多糖物质。

原理:过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化成二醛,再与Schiff氏液的无色品红结合,红色,定位于胞浆上。


PAS糖原染色方法:

固定液

Carnoy固定液: 纯

无水乙醇60 ml 冰醋酸10ml,也可以选用75%无水乙醇。


PAS糖原染色液配制

1) 过碘酸酒清夜配法:

过碘酸(HIO4·2H2O) 0.4g 95%  无水乙醇 35ml M/5醋酸钠(2.72g+蒸馏水100ml) 5ml蒸馏水10ml。

保存于冰箱内,用棕色瓶,可用两周。


2)Schiff氏液:0.5克碱性品红加入100毫升蒸馏水中,时时摇动三角瓶5分钟,使之充分溶解。冷却至50℃后过滤加入10毫升1N盐酸,冷却至25℃,加入0.5-1克偏重硫酸钠,在室温中至少静置24小时,然后密封冰箱保存。


3) Schiff氏  无水乙醇配置 Schiff氏液 11.5ml 1N HCI 0.5ml 纯无水乙醇 23ml


4) 亚硫酸水 1%偏重亚硫酸钠10ml 1N HCI 10ml 蒸馏水 180ml的树胶溶解。


5)哈瑞或迈耶苏木精


PAS糖原染色步骤:

1. 石蜡切片脱蜡至水(细胞涂片,冰冻切片直接水洗);


2. 蒸馏水洗;


3. 过碘酸酒清夜10min;


4. 自来水冲洗10min;


5. Schiff氏液10min;


6. 流水冲洗5min;


7.用哈瑞苏木精或迈耶苏木精染核3min(细胞核染色过深可用盐酸酒精分化);


8. 流水冲洗5min;


9. 常规脱水、透明、封固。


结果

PAS阳性为红色,细胞核蓝色。


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