更新时间:2024-09-26
PAS糖原染色(Periodic Acid-Schiff stain)在组织学上,主要用来检测组织中的糖类。过碘酸把糖类相邻两个碳上的羟基氧化成醛基,再用Schiff试剂和醛基反应使呈现紫红色。
PAS糖原染色又称过碘酸雪夫染色,糖原染色。一般用来显示糖元和其它多糖物质。
原理:过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化成二醛,再与Schiff氏液的无色品红结合,红色,定位于胞浆上。
PAS糖原染色方法:
固定液
Carnoy固定液: 纯
无水乙醇60 ml 冰醋酸10ml,也可以选用75%无水乙醇。
PAS糖原染色液配制
1) 过碘酸酒清夜配法:
过碘酸(HIO4·2H2O) 0.4g 95% 无水乙醇 35ml M/5醋酸钠(2.72g+蒸馏水100ml) 5ml蒸馏水10ml。
保存于冰箱内,用棕色瓶,可用两周。
2)Schiff氏液:0.5克碱性品红加入100毫升蒸馏水中,时时摇动三角瓶5分钟,使之充分溶解。冷却至50℃后过滤加入10毫升1N盐酸,冷却至25℃,加入0.5-1克偏重硫酸钠,在室温中至少静置24小时,然后密封冰箱保存。
3) Schiff氏 无水乙醇配置 Schiff氏液 11.5ml 1N HCI 0.5ml 纯无水乙醇 23ml
4) 亚硫酸水 1%偏重亚硫酸钠10ml 1N HCI 10ml 蒸馏水 180ml的树胶溶解。
5)哈瑞或迈耶苏木精
PAS糖原染色步骤:
1. 石蜡切片脱蜡至水(细胞涂片,冰冻切片直接水洗);
2. 蒸馏水洗;
3. 过碘酸酒清夜10min;
4. 自来水冲洗10min;
5. Schiff氏液10min;
6. 流水冲洗5min;
7.用哈瑞苏木精或迈耶苏木精染核3min(细胞核染色过深可用盐酸酒精分化);
8. 流水冲洗5min;
9. 常规脱水、透明、封固。
结果
PAS阳性为红色,细胞核蓝色。
毓秀生物科技(上海)有限公司是一家专注于生物科技前沿技术研发和科研技术服务的公司,公司建有专业的分子生物学、细胞生物学、组织病理学实验室,为众多生物医药企业、科研机构、医院及高校提供分子生物学、细胞生物学、病理形态学等方面科研服务。公司核心团队曾在国内外许多优秀学府从事过多年研发工作,秉承“为客户创造价值,为员工实现梦想,为社会创造财富"的经营理念,坚持以技术创新为先导,以服务质量为根本,为中国生物医药和科学研究提供优质的产品和技术服务。