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苏木素染色液

更新时间:2022-10-13

简要描述:

苏木素染色液染色后细胞核呈蓝色。本染色液可以和免疫荧光染色或免疫组化染色配合使用。

苏木素染色液染色后细胞核呈蓝色。本染色液可以和免疫荧光染色或免疫组化染色配合使用。一方面可以在本苏木素染色液染色后进行免疫荧光染色或其它染料的染色,另一方面也可以在免疫组化染色后再进行苏木素复染。本染色液可以重复使用,直至认为效果不佳时再换用新的染色液。一个包装的本染色液至少可以染色200个样品。


苏木素染色液使用说明:

1. 样品处理


a) 对于石蜡切片:

二甲苯中脱蜡5-10分钟。

换用新鲜的二甲苯,再脱蜡5-10分钟。

无水乙醇5分钟。

90%乙醇2分钟。

70%乙醇2分钟。

蒸馏水2分钟。


b) 对于冰冻切片:

蒸馏水2分钟。


c) 对于培养细胞:

用4%多聚甲醛固定10分钟以上。

蒸馏水洗涤2分钟。

换用新鲜的蒸馏水,再洗涤2分钟。


2. 苏木素染色

对于上述处理好的样品:苏木素染色液染色5-10分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)。

浸自来水中冲洗去多余的染色液,约10分钟。

蒸馏水再洗涤一遍(数秒钟)。

95%乙醇5秒。

此时,如果需要直接观察,可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行,70%乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。

注:如果用于免疫组化等染色后的复染,可以参考上述步骤在其它染色完成后直接进行苏木素染

色。


3. 脱水、透明、封片或进行其它染色


a) 脱水、透明、封片:

95%乙醇脱水2分钟。

换用新鲜的95%乙醇再脱水2分钟。

二甲苯透明5分钟。

换用新鲜的二甲苯,再透明5分钟。

用中性树胶或其它封片剂封片。

显微镜下观察,细胞核呈蓝色。


b) 进行其它染色:

如果进行免疫荧光染色,或进行Hoechst等荧光染料的染色,在

苏木素染色液染色后:

70%乙醇洗涤2次,每次2分钟。

PBS或生理盐水或TBS或TBST等用于免疫染色或荧光染料染色的溶液浸泡5分钟。

然后就可以进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色了。


保存条件:

室温避光保存,至少一年有效。


注意事项:

需自备4%多聚甲醛、70%乙醇和95%乙醇。如果需要脱水、透明和封片处理,还需自备二甲苯,中性树胶或其它封片剂。如果样品是石蜡切片,需自备90%乙醇,无水乙醇以及二甲苯。

染色液可以重复使用多次,认为效果不佳时再更换新的染色液。

使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


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