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茜素红染色

更新时间:2022-10-13

简要描述:

成骨诱导的过程是使钙离子能够以钙盐的方式沉淀下来,即“钙结节",鉴定钙结节的染色方法常用茜素红染色法。

茜素红染色实验原理:

  1. 成骨诱导的过程是使钙离子能够以钙盐的方式沉淀下来,即“钙结节",鉴定钙结节的染色方法常用茜素红染色法。


     2.茜素红:茜素磺酸钠,茜素s,茜素红s,茜素胭脂红,1,2-二羟基葱醒-3-磺酸钠,1,2-二羟基葱醒-3-磺酸钠盐。橙黄色或黄棕色粉末。易溶于水,微溶于乙醇,不溶于苯。1%水溶液pH为2.15,其水溶液呈前黄褐色,加盐酸后变为黄色,加氢氧化钠后则变成蓝紫色。有刺激性。能与许多金属离子生成有色化合物,能与错、钍、铝、钛及钙发生显色反应。


    3.染色原理:茜素红与钙发生显色反应,产生一种深红色的带色化合物,这样成骨诱导的细胞外面沉积的钙结节也就被染成了深红色。


茜素红染色实验试剂及仪器:

  1. 试剂:PBS10醛缓冲液0.1%茜素红-Tris-HCL染液蒸馏水


    2.仪器:倒置显微镜


茜素红染色实验步骤:

  1. 弃培养液,PBS冲洗2次


    2.10%甲醛缓冲液固定10min


    3.蒸馏水冲洗3次


    4.加入0.1%茜素红-Tris-HCL染液(pH8.3),37℃下染色30min


    5.蒸馏水冲洗


    6.在倒置显微镜下观察有无茜素红染色阳性细胞


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