茜素红染色

实验原理：

1.成骨诱导的过程是使钙离子能够以钙盐的方式沉淀下来，即“钙结节"，鉴定钙结节的染色方法常用茜素红染色法。

2.茜素红：茜素磺酸钠，茜素s，茜素红s，茜素胭脂红，1，2-二羟基葱醒-3-磺酸钠，1，2-二羟基葱醒-3-磺酸钠盐。橙黄色或黄棕色粉末。易溶于水，微溶于乙醇，不溶于苯。1%水溶液pH为2.15，其水溶液呈前黄褐色，加盐酸后变为黄色，加氢氧化钠后则变成蓝紫色。有刺激性。能与许多金属离子生成有色化合物，能与错、钍、铝、钛及钙发生显色反应。

3.染色原理：茜素红与钙发生显色反应，产生一种深红色的带色化合物，这样成骨诱导的细胞外面沉积的钙结节也就被染成了深红色。

实验试剂及仪器：

1.试剂：PBS10醛缓冲液0.1%茜素红-Tris-HCL染液蒸馏水

2.仪器：倒置显微镜

实验步骤：

1.弃培养液，PBS冲洗2次

2.10%甲醛缓冲液固定10min

3.蒸馏水冲洗3次

4.加入0.1%茜素红-Tris-HCL染液（pH8.3），37℃下染色30min

5.蒸馏水冲洗

6.在倒置显微镜下观察有无茜素红染色阳性细胞

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