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TTC染色液

更新时间:2021-12-15

简要描述:

TTC染色液
TTC染色是TTC和活细胞线粒体内的琥珀酸脱氢酶反应,生成红色的甲臜,用来表示细胞的活力。配制多为2%,染色要避光,37度条件下,它是评价脑缺血损伤常用的指标。

TTC染色液

TTC染色液是TTC和活细胞线粒体内的琥珀酸脱氢酶反应,生成红色的甲臜,用来表示细胞的活力。配制多为2%,染色要避光,37度条件下,它是评价脑缺血损伤常用的指标。

1原理:TTC(2,3,5—氯化三苯基四氮唑)是脂溶性光敏感复合物,1894年*合成用来检测种子的生存能力,1958年开始用来染色检测哺乳动物组织的缺血梗塞。它是呼吸链中吡啶—核苷结构酶系统的质子受体,与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色,而缺血组织内脱氢酶活性下降,不能反应,故不会产生变化呈苍白。

2 取脑:可麻醉后直接取脑或经生理盐水灌注后取脑。因为脑组织未用多聚甲醛固定,所以较软,取脑时更应仔细,保持大脑的完整性。

3 -20度冰箱中速冻20分钟左右,便于切片。

4 切片:一般切成5-6片,每隔2mm切一片。一刀在脑前极与视交叉连线中点处;第二刀在视交叉部位;第三刀在漏斗柄部位;第四刀在漏斗柄与后叶尾极之间。(参考:张均田,主编.现代药理试验方法)。如果需计算面积的话,应切得均匀或用专门的脑槽。

5将切片置于TTC中,常规浓度为2%,也有用1%或更低浓度的。

6用锡箔纸盖住后,放入37C温箱15~30min,不时翻动脑片,使均匀接触到染色液。也可以用将脑片放入多孔板,再滴入TTC,覆以圆形盖玻片使均匀染色。

7 染色后效果:为皮层下梗死。


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