油红O脂肪染色

　　油红O脂肪染色法是指在日常病理诊断和科研工作中为了显示组织内的脂肪常采用油红O进行染色的方法，油红O为脂溶性染料，在脂肪内能高度溶解，可特异性的使组织内甘油三酯等中性脂肪着色。

      油红O脂肪染色服务详细介绍：

       2. 改良的油红O染色液 油红O 0. 5g, 50%乙醇100ml。将油红O溶于乙醇内,且不断搅拌至*溶解即可。配制好的染液置磨口瓶内保存备用。

       3. 染色步骤 ①切片干燥后入50%乙醇稍洗;②油红O乙醇染液作用8min;③50%乙醇分化,自来水终止分化;④苏木素复染核,自来水返蓝,甘油明胶封片.油红O染色法×400

　　油红0脂肪染色法是指在日常病理诊断和科研工作中为了显示组织内的脂肪常采用油红0进行染色的方法，油红0为脂溶性染料，在脂肪内能高度溶解，可特异性的使组织内甘油三酯等中性脂肪着色。

　　正常情况下，除脂肪细胞外其他细胞内-般不见或仅见少量脂滴。在病理状态下如这些细胞中出现脂滴或脂滴明显增多，特别是在心、肝.肾等实质器官发生脂肪变性时，胞浆内出现大小不一的空泡， 这时常需鉴别空泡性质，用脂肪染色来区分是脂肪变性还是水样变性或糖原贮留。在动脉粥样硬化时，内皮细胞下的脂质沉著，用脂肪染色能将脂质清晰地显示出来。由脂肪组织病变所弓|起的脂肪栓塞可用脂肪染色显示栓子内的脂质，从而确诊脂肪栓塞。用于肿瘤组织的鉴别诊断，由脂肪组织所发生的肿瘤在与其他组织来源的肿瘤相区分时，可以借助脂肪染色，脂肪组织所发生的肿瘤，脂肪染色为阳性。并可根据所显示的细胞形态特点与类似肿瘤进行鉴别，肾透明细胞癌与肾上腺瘤，卵巢纤维瘤与卵泡膜细胞瘤。皮脂腺瘤与鳞状细胞癌的鉴别诊断有意义。

       2.染色:入油红0工作液孵育10-15min;细胞爬片破膜10-15min, PBS漂洗3次，5min次， 入油红工作液37°C染色1-2h。

       3.分化: 75%酒精分化2s,水洗1min。

       4、复染细胞核: Harris苏木素复染1-2min左右， 自来水洗，1%的盐酸酒精分化数秒,自来水冲洗，氨水返蓝，流水冲洗。

       5、封片:用纸巾吸去周边水分，甘油明胶封片。

　　脂滴呈橘红色至鲜红色:细胞核呈深蓝色。

       1.油红0是对脂类物质进行染色，石蜡切片在处理过程中脂类物质无法保存，所以石蜡切片不能进行油红0染色。

　　2.油红0染液使用一段时间后，染出的脂滴颜色会偏黄，此时就需要更换染液。

　　3.油红染色时，动作要轻，因为脂滴易移位，并且在封片时应避免盖玻片滑动。

　　传统配制油红O染液   ,所用的丙酮和异丙醇极易挥发,致使染液产生沉淀,染色时易在组织片上留下红色的结晶,而影响结果的判断。同时染液不易保存,每次染色时需要重新配制。我们经实验,采用50%乙醇作为溶解剂,减少了丙酮和异丙醇易挥发对人体的危害,染液不易产生沉淀;分化剂与油红O染液中的溶剂性质相似,这样利于切片上多余染液的分化,故组织切片上没有结晶产生。从而为病理诊断及鉴别诊断提供了可靠技术方法。组织常规用中性福尔马林固定,但用甲醛—钙液(40%甲醛10ml,蒸馏水90m1,氯化钙1g)固定效果更好,这样有利于保存磷脂。

　　封固显示脂肪的切片时,切片不宜太干,否则易产生气泡。发现有气泡,不能压盖玻片驱赶,因为这样会使脂滴移位。若有气泡可用温水浸掉盖玻片,而后再封固。

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