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TRAP染色

更新时间:2022-02-11

简要描述:

TRAP染色是用于检测骨组织、骨细胞中特征物质的染色,使破骨细胞呈红色,背景呈绿色或蓝色。抗酒石酸酸性磷酸酶(Trap)为破骨细胞的标志酶,特异地分布于破骨细胞中,为破骨细胞所特有,通常作为鉴别破骨细胞的重要标志物。

     alp碱性磷酸酶染色服务技术介绍
  碱性磷酸酶染色,又称Alp染色,是用于检测骨细胞、骨组织、肾、肝碱性磷酸酶的染色方法,使碱性磷酸酶呈黑色,细胞核呈浅蓝色,这是成熟成骨细胞的标志性酶;也可用于肝炎和肾炎的检测。
  碱性磷酸酶染色实验流程
  (1)样本接收:石蜡切片、细胞爬片、冰冻切片
  (2)实验步骤:脱蜡至水—染液配制-Alp染色-苏木素浅染核
  (3)实验结果:染色好的玻片
  alp碱性磷酸酶染色服务注意事项
  1、注意染液要现配现用。
  2、注意切片要用超纯水水洗。
  TRAP染色是用于检测骨组织、骨细胞中特征物质的染色,使破骨细胞呈红色,背景呈绿色或蓝色。抗酒石酸酸性磷酸酶(Trap)为破骨细胞的标志酶,特异地分布于破骨细胞中,为破骨细胞所特有,通常作为鉴别破骨细胞的重要标志物。
  TRAP染色服务内容
  1、石蜡切片4~5um,脱蜡至水洗;细胞爬片或者冰冻切片用80%酒精固定后蒸馏水水洗3次,每次3分钟。
  2、配制六偶氮副品红溶液
  3、配制孵育液:取1ml六偶氨副品红加到18ml醋酸盐溶中,再加入1ml紫酚ASBI磷酸盐溶液,再加酒石酸钾钠        282mg。调pH值5.0,过滤备用;
  4、阴性对照孵育液:取1ml六偶氨副品红加到18ml醋酸盐溶中,再加酒石酸钾钠282mg。调pH值5.0,过滤备用
  5、切片入37℃蒸馏水水洗30秒;
  6、入孵育液37℃孵育50-60分钟;
  7、去离子水水洗3分钟;8、入苏木素复染40秒;
  9、自来水水洗10分钟返蓝;
  10、甘油明胶封片
  alp碱性磷酸酶染色服务原理
  人血液和造血细胞的碱性磷酸酶pH值为9.4,主要见于中性粒细胞系的成熟阶段或晚幼粒细胞。在不同生理状态和病理状态中均有明显的改变,具有鉴别诊断意义。
  方法
  目前碱性磷酸酶染色法有改良Gomori法及偶氮偶联法 (Kaplow)。
  改良Gomori法原理为: 细胞内碱性磷酸酶水解试剂中的甘油磷酸钠释放出无机磷酸盐,与钙离子作用生成磷酸钙,再与钴离子作用生成磷酸钴,后与硫化铵生成黑色硫化钴颗粒,沉淀于细胞浆中。
  偶氮偶联法原理为:细胞中碱性磷酸酶在pH 9.5~9.8的缓冲液中,催化α-磷酸萘酚偶联成不溶性有色偶氮染料沉淀于细胞浆中。
  结果解读
  ALP活性仅见于成熟或接近成熟的中性粒细胞。计数100个中性粒细胞中阳性细胞数,称阳性率。还可按阳性细胞中的颗粒密度分为1~5级,指数各为1~5。计算100个中性粒细胞,将每个细胞的指数相加,其总和称阳性指数或积分,作为判断酶活性的半定量的指标。由于方法及条件的不同,正常差别很大,故每次检查时应作正常对照。本法的正常值阳性率为60~99%,阳性指数169~367,平均为274。
 
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