饱和油红O染色液

       饱和油红O染色液属于偶氮染料，是很强的脂溶剂和染脂剂，与甘油三酯结合呈小脂滴状。脂溶性染料能溶于组织和细胞中的脂类，它在脂类中的溶解度比在溶剂中大。当组织切片置人染液时，染料则离开染液而溶于组织内的脂质（如脂滴）中，使组织内的脂滴呈橘红色。

一、饱和油红O染色液的配制

       脂质(Lipid)是中性脂肪、类脂及其衍生物的总称，其共同的物理特性是不溶于水，易溶于有机溶剂(如乙醇等)。人体的脂肪主要有两种：1、储存脂肪，如中性脂肪，主要分布于皮下、肾、胰腺等部位。2、结构脂肪，如类脂(磷脂、糖脂、胆固醇等)，主要分布于细胞内。中性脂肪(Neutral fat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油组成的脂类，呈中性。中性脂肪是储存能量的方式之一，在氧化时释放出能量。中性脂肪染色经常采用苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ、苏丹黑B、油红O法等。传统方法采用苏丹染料，近发现偶氮染料油红O更适合脂肪的染色。油红O是很强的脂溶剂和染脂剂，较易不甘油三脂结合呈小脂滴状，不磷脂结合力稍差，其染色原理一般认为是物理上的溶液作用或吸附作用，借溶液作用使脂肪染色。染料在细胞内脂质的溶解度较原溶剂中的溶解度更大，所以在染色时染料就从有机溶剂转移入脂质而使脂肪染色。

      饱和油红O染色液(细胞)简称ORO染色液，可显示小的脂滴，可优先为脂类从溶剂中吸附染料。标本不采用含有乙醇的固定液，如需要固定可采用10%福尔马林)。脂肪阳性染色结果呈橘黄至红色，但具体颜色因脂质浓度而定。

1．油红O 1g

异丙醇 100ml

2．油红O 足量

异丙醇 100ml

配成油红O饱和溶液，使用时以油红O饱和液一份加蒸馏水两份，过滤后使用。

二、染色程序

1．切片用甲醛―钙固定10分钟；

2．蒸馏水洗；

3．60％异丙醇浸洗；

4．1由红O染液10分钟(染液可回收再利用)；

5． 60％异丙醇分色至背景五色；

6．蒸馏水洗；

7．Mayer苏木精复染；

8．自来水洗(蓝化)1～3分钟；

9．蒸馏水洗；

10．甘油明胶封片。

结果：组织细胞中脂滴呈橘红色，核呈蓝色。

油红O脂类染色澄  显示大鼠脂肪肝中肝细胞内染为红色大脂

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