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饱和油红O染色液

更新时间:2022-10-13

简要描述:

饱和油红O染色液属于偶氮染料,是很强的脂溶剂和染脂剂,与甘油三酯结合呈小脂滴状。脂溶性染料能溶于组织和细胞中的脂类,它在脂类中的溶解度比在溶剂中大。当组织切片置人染液时,染料则离开染液而溶于组织内的脂质(如脂滴)中,使组织内的脂滴呈橘红色。

       饱和油红O染色液属于偶氮染料,是很强的脂溶剂和染脂剂,与甘油三酯结合呈小脂滴状。脂溶性染料能溶于组织和细胞中的脂类,它在脂类中的溶解度比在溶剂中大。当组织切片置人染液时,染料则离开染液而溶于组织内的脂质(如脂滴)中,使组织内的脂滴呈橘红色。


一、饱和油红O染色液的配制

       脂质(Lipid)是中性脂肪、类脂及其衍生物的总称,其共同的物理特性是不溶于水,易溶于有机溶剂(如乙醇等)。人体的脂肪主要有两种:1、储存脂肪,如中性脂肪,主要分布于皮下、肾、胰腺等部位。2、结构脂肪,如类脂(磷脂、糖脂、胆固醇等),主要分布于细胞内。中性脂肪(Neutral fat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油组成的脂类,呈中性。中性脂肪是储存能量的方式之一,在氧化时释放出能量。中性脂肪染色经常采用苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ、苏丹黑B、油红O法等。传统方法采用苏丹染料,近发现偶氮染料油红O更适合脂肪的染色。油红O是很强的脂溶剂和染脂剂,较易不甘油三脂结合呈小脂滴状,不磷脂结合力稍差,其染色原理一般认为是物理上的溶液作用或吸附作用,借溶液作用使脂肪染色。染料在细胞内脂质的溶解度较原溶剂中的溶解度更大,所以在染色时染料就从有机溶剂转移入脂质而使脂肪染色。


      饱和油红O染色液(细胞)简称ORO染色液,可显示小的脂滴,可优先为脂类从溶剂中吸附染料。标本不采用含有乙醇的固定液,如需要固定可采用10%福尔马林)。脂肪阳性染色结果呈橘黄至红色,但具体颜色因脂质浓度而定。


1.油红O 1g

异丙醇 100ml

2.油红O 足量

异丙醇 100ml

配成油红O饱和溶液,使用时以油红O饱和液一份加蒸馏水两份,过滤后使用。


二、染色程序

1.切片用甲醛―钙固定10分钟;

2.蒸馏水洗;

3.60%异丙醇浸洗;

4.1由红O染液10分钟(染液可回收再利用);

5. 60%异丙醇分色至背景五色;

6.蒸馏水洗;

7.Mayer苏木精复染;

8.自来水洗(蓝化)1~3分钟;

9.蒸馏水洗;

10.甘油明胶封片。


结果:组织细胞中脂滴呈橘红色,核呈蓝色。

油红O脂类染色澄  显示大鼠脂肪肝中肝细胞内染为红色大脂



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