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生物透射(扫描)电镜固定液

更新时间:2022-10-13

简要描述:

生物透射(扫描)电镜固定液
生物透射电镜服务以及生物样品扫描电镜都需要光学透镜的焦点是固定的,而电子透镜的焦点可以被调节,因此电子显微镜不像光学显微镜那样有可以移动的透镜系统。现代电子显微镜大多采用电磁透镜,由很稳定的直流励磁电流通过带极靴的线圈产生的强磁场使电子聚焦。

生物透射(扫描)电镜固定液

生物透射电镜服务以及生物样品扫描电镜都需要光学透镜的焦点是固定的,而电子透镜的焦点可以被调节,因此电子显微镜不像光学显微镜那样有可以移动的透镜系统。现代电子显微镜大多采用电磁透镜,由很稳定的直流励磁电流通过带极靴的线圈产生的强磁场使电子聚焦。电子源是一个释放自由电子的阴极,栅极,一个环状加速电子的阳极构成的。由于光学显微镜分辨率的限制,虫体表面细节很难在光镜下观察清楚,给线虫分类带来了较大困难。

  电镜技术包含扫描电镜(scanning electron microscopy,SEM)以及透射电镜(transmission electron microscope,TEM)。扫描电子显微镜,简称为扫描电镜,是用细聚焦的电子束轰击样品表面,通过电子与样品相互作用产生的二次电子、背散射电子等对样品表面或断口形貌进行观察和分析。SEM已广泛应用于材料、冶金、矿物、生物学等领域。透射电镜:是以波长极短的电子束作为照明源,用电磁透镜聚焦成像的一种具有高分辨本领、高放大倍数的电子光学仪器,主要应用于物质内部的超微结构观察。
  样品扫描电镜透射电镜固定液介绍:
  固定的目的是尽可能使细胞中的各种细胞器以及大分子结构保持生活状态,并且牢固地固定在它们原来所在的位置上。固定的方法有物理的和化学的两大类。物理的方法系采用冰冻、干燥等手段来保持细胞结构;化学的方法是用一定的化学试剂来固定细胞结构。现通常使用化学方法对组织或细胞进行固定。
  生物透射(扫描)电镜固定液是常用固定剂:
  1、是一种强氧化剂,与氮原子有较强的亲和力,因而对于细胞结构中的蛋白质成分有良好的固定作用。它还能与不饱和脂肪酸反应使脂肪得以固定。此外,还能固定脂蛋白,使生物膜结构的主要成分磷脂蛋白稳定。它还能与变性DNA以及核蛋白反应,但不能固定天然DNA、RNA及糖原。固定剂有强烈的电子染色作用,用它固定的样品图象反差较好。固定的时间一般为1-2小时。
  2.戊二醛(glutaraldehyde
  C5H8O2),戊二醛的优点是对糖原、糖蛋白、微管、内质网和细胞基质等有较好的固定作用,对组织和细胞的穿透力比强,还能保存某些酶的活力,长时间的固定(几周甚至1~2个月)不会使组织变脆。缺点是不能保存脂肪,没有电子染色作用,对细胞膜的显示较差。
  组织块固定常规采用戊二醛—双重固定法。分预固定和后固定,中间用磷酸缓冲液漂洗。前固定用2.5%戊二醛固定2小时以上、后固定用1%固定液固定1~2小时,pH7.3~7.4。
  固定完毕,用缓冲液漂洗20分钟后进行脱水。

 

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