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电镜固定液的使用说明和保存条件
发布时间:2022-11-10   点击次数:53次
   电镜固定液(2.5%,电镜专用)由戊二醛、磷酸盐、去离子水等组成,pH7.2~7.4,该固定液对细胞核、细胞浆的细微结构固定效果好,经常用于电镜标本的固定。
  使用说明:
  组织:组织取材后一分钟内必须进入戊二醛,取材部位一定要准确,大小尽量控制1个立方毫米以内或更小。取完材后放4℃固定4小时以上.送检。运输2-8℃保存。
  贴壁细胞:培养好的细胞倒掉培养基迅速加入预冷的电镜固定液,细胞刮快速刮下细胞后转移至15ml离心管内(勿用胰酶),转速500-800rpm离心5min(成团细胞大小为绿豆大小为宜),成团,随后去除大部分上清液(留1ml左右),转至1.5离心管中,静止自然沉降1h(2-8℃),去上清,再加入1ml新鲜电镜固定液放2-8℃固定保存。
  悬浮细胞:将细胞培养液转移至15ml离心管内离心,转速800-1000rpm,离心5min成团(成团细胞大小为绿豆大小为宜),随后去除大部分上清(留1ml),转移至1.5ml离心管中,静止自然沉降1h(2-8℃),去上清,再加入1ml新鲜电镜固定液放2-8℃固定保存。
  电镜固定液保存条件:
  4°C保存,一年有效操作说明将取出的组织切成1mm3大小,然后用牙签或镊子将组织块移至盛有冷的固定液的小瓶中在4°C条件下固定2-4h。如果组织带有较多的血液和组织液,应先用固定液洗几遍,然后再切成小块固定。如不能一次性切成1mm3的大小也可以先切成稍微大点的组织块,然后边固定边修成1mm3大小的。
  注意事项:
  1.戊二醛渗透性较差,所以取材要控制在1个立方毫米左右。
  2.取完材后尽快放入电镜固定液中。
  3.加入固定液的组织放2-8℃固定保存。
  保存条件:2-8℃避光保存,1年有效。
  以上知识仅供参考,希望以上知识对您有所帮助哦!
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